Sistema de Extracción Magnética de ARN a partir de muestras biológicas.

Elaborado en colaboración con el Instituto de Medicina Tropical Pedro Kourí (IPK) CEA-NANO+ RNA3.0 es el primer producto nanotecnológico 100% cubano.  Diseñado por nuestros expertos para la extracción y purificación de ARN de origen viral.

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El límite de detección de algunos virus depende del sistema de detección empleado (ej. in-house nested RT-PCR). Se recomienda utilizar controles internos, controles positivos y negativos para monitorizar los procesos de purificación, amplificación y detección.

Los ácidos nucleicos virales purificados con el CEA-NANO+ RNA 3.0 no podrán ser cuantificados por espectrofotometría o fluorimetría ya que los eluatos contendrán ARN extraído más Carrier RNA; para su cuantificación puede utilizarse otros métodos como PCR o RT-PCR cuantitativas.


CEA-NANO+ RNA 3.0 está diseñado para la extracción y purificación de ARN de origen viral a partir de 200 µL de muestras biológicas como exudados respiratorios, secreciones respiratorias o macerados de tejidos.

Su uso, en principio, no está indicado para extracciones a partir de REV.03-03/2021 muestras sanguíneas, plasma, suero, orina u otras; sin embargo, puede realizarse realizando pequeñas modificaciones en el protocolo (dilución 1:10 de la muestra en PBS).

Sistema de Extracción Magnética

En el primer paso de extracción la muestra que contiene virus ARN es lisada mediante incubación en la Solución Lisis-Unión RNA 3.0 (SLU-RNA 3.0) rica en detergentes iónicos y agentes caotrópicos que permite la lisis celular y la desnaturalización de las proteínas, liberando así el ARN4 . De igual manera contiene agentes que inhiben las RNasas presentes en las muestras biológicas y estabilizan el ARN.  La adición posterior de Solución de Precipitación RNA 3.0 (SPRNA 3.0) a la muestra lisada crea las condiciones adecuadas para la unión del ARN a las nanopartículas NESP-A380 incluida en el kit. Este paso de unión es reversible y específico para cada tipo ácido nucleico, y depende de la Solución Lisis-Unión RNA 3.0 utilizada (SLU- RNA 3.0).

El Carrier RNA contenido en la SLU-3.0, unido a las NESP-A380 mejora la unión y el rendimiento en muestras diluidas o con baja concentración de ARN viral. Los contaminantes presentes en la muestra (sales, metabolitos, componentes celulares solubles) son eliminados mediante sucesivos lavados del ARN unido a las NESP-A380 con las Soluciones de Lavado (SLV-1, 2 y 3). Las NESP-A380 se secan para eliminar restos de las SLV y el ARN es finalmente eluido en la Solución de Elución RNA 3.0 (SE-RNA 3.0) que contiene baja concentración de sales específicas y compuestos que garantizan una máxima lixiviación y estabilización del ARN.

Reactivos que incluye el KIT

La ausencia de RNasas, así como el rendimiento y eficiencia del proceso de purificación han sido ensayados con RT-PCR.
¡IMPORTANTE! El empaquetado y embazado puede variar del que se muestra en el sitio.
Los diferentes componentes del kit se detallan a continuación:

Componentes/Referencia
CEA-P-01A 500 determinaciones
CEA-P-01B 250 determinaciones

SLU-RNA 3.0 - Solución de Lisis-Unión RNA 3.0
1 x 110 mL
1 x 55 mL

NESP-A380 - Solución de NESP-A380
1 x 60 mL
1 x 30 mL

SLV- 1 - Solución de Lavado 1
1 x 260 mL
1 x 130 mL

SLV- 2 - Solución de Lavado 2 
1 x 260 mL
1 x 130 mL

SLV- 3 - Solución de Lavado 3
1 x 260 mL
1 x 130 mL

SP-RNA 3.0 – Solución de Precipitación
1 x 260 mL
1 x 130 mL

SE-RNA 3.0 - Solución de Elución RNA 3.0
1 x 100 mL
1 x 50 mL
Instrucciones para el uso (instructivo)
1
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Instrucciones de Almacenamiento 

¡IMPORTANTE!: La solución SLU RNA 3.0 contiene sales que pueden irritar la piel y las mucosas, utilice guantes y gafas de protección durante su manipulación. Los reactivos incluidos en el kit pueden almacenarse a temperatura ambiente (15-40 °C) hasta la fecha de caducidad indicada en la etiqueta del envase externo.

¡IMPORTANTE! – antes de utilizar la solución de NESP-A380, homogenizar constante y enérgicamente, rotando el frasco antes de adicionar a cada pocillo. NO DAR VÓRTE

MPORTANTE!: No almacenar ninguno de los componentes del estuche a temperaturas superiores a 40 °C. La degradación se acelerará si se conserva incorrectamente, se incuba a temperaturas >80 °C, o se prolonga el tiempo de incubación a 50 °C durante la lisis a más de 15 min. La degradación reduce el rendimiento de la extracción y puede producir falsos negativos en la RT-PCR, en particular si se trabaja con muestras con una carga viral baja. No almacenar a temperaturas inferiores a 25 °C, puesto que en el SLU-RNA 3.0 pueden aparecer precipitados de sales que pueden interferir con el proceso de extracción. No obstante, desaparecen al calentar a 37 °C. NO REFRIGERAR.

Sobre CEA-NANO+ 
1. CEA-NANO+ es una submarca del CEA por lo que debido a que esta dirigida a un sector especifico de mercado posee identidad y valores propios que la diferencian de la marca matriz.
Sobre el producto 
1. El empaquetado y el embazado puede variar del que se muestra en el sitio.
Sobre el Instructivo 
1. La extracción del ARN viral mediante el método de extracción a partir de muestras biológicas como: exudado nasofaríngeo, exudado faríngeo ,macerados de tejidos (Todas las muestras biológicas deben ser manejadas según los procedimientos y normas de Bioseguridad aplicables al nivel de riesgo del agente biológico en cuestión. Para el SARS-CoV-2, aunque la Solución Lisis-Unión RNA 3.0 logra la inactivación viral1-2 , toda muestra debe ser manejada según los procedimientos establecidos)
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